PCR实验室设计的区域划分一览
PCR实验室设计必须做好区域划分,具体来说可以把PCR实验室划分为4个区域,即:试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。
下面上海三仁小编先来简单介绍一下PCR实验室,这种实验室又叫“基因扩增实验室”。所谓“PCR”,简单来说就是“Polymerase Chain Reaction”的简称,意思是聚合酶链式反应。
PCR是一种分子生物学技术,通过这项技术能够放大特定的DNA片段,就好像是生物体外的特殊DNA复制一样。通过PCR实验室的实验,就能够迅速掌握待检品中的病毒含量,其度高达纳米级别。
PCR实验室设计的区域划分
1.试剂贮存和准备区:此区域的作用是贮存试剂的制备、试剂的分装、主反应混合液的制备。注意事项是实验项目所使用的材料,如试剂与试剂原材料,标本与标本原材料等,这些都必须存放于本区内。至于是否需要控制气流压力,本区倒是没有严格要求。
2.标本制备区:此区域的作用是临床标本的保存、核酸(RNA与DNA)的提取与贮存、核酸加入至扩增反应管和测定RNA时DNA的合成。注意事项是为了防止邻近区域的空气进入本区,压力梯度对比邻近区域要设置成正压。进行实验项目的操作时,工作人员要避免不必要的走动,以防止加样操作中发生气溶胶污染。
3.扩增反应混合物配制和扩增区:此区域的作用是DNA扩增、把制备的实验试剂做成反应混合液。注意事项是实验扩增的污染指数比较高,压力梯度对比邻近区域要设置成负压,这样做的好处是能有效防止气溶胶从本区泄漏。
4.扩增产物分析区:此区域的作用是测定相关扩增片段。注意事项是实验室设计时如果已经预设了全自动封闭分析仪器,那么就没有必要再划分本区了。本区的压力梯度对比邻近区域要设置成负压,这样做的好处是能有效防止扩增产物扩散至其它区域。
PCR实验室设计除了要做好区域划分外,完备的配套设施也是必不可缺的。这么说吧,它是保证实验工作的必要条件,但要根据实验内容来配备相应的设备和仪器,如超净工作台、生物柜、离心机、加样器等。